@MASTERSTHESIS{ 2007:645561634,
 	title = {Expressão e purificação de uma proteína multiepítopo recombinante desenhada a partir de proteínas do vírus da hepatite C},
 	year = {2007},
 	url = "http://localhost:8080/tede/handle/tede/3075",
 	abstract = "A hepatite C é considerada um dos maiores problemas de saúde pública no
 mundo inteiro, inclusive no Brasil, pois uma vacina preventiva não está disponível, o
 número de infectados com a forma assintomática é elevado e para o controle da doença,
 há somente kits importados. Considerando, principalmente, o aumento da preocupação
 com a detecção precoce da hepatite C e que os métodos de diagnóstico desta infecção
 são de grande relevância clínica, o presente trabalho propõe a expressão e purificação de
 uma proteína codificada por um gene sintético (MEHCV   Multiepítopo HCV). Para
 atingir este objetivo, uma proteína multiepítopo recombinante foi desenhada a partir de
 epítopos lineares, imunodominantes e filogeneticamente conservados do vírus da
 hepatite C (HCV), com a inclusão de seqüências imunodominantes dos genótipos mais
 prevalentes no Brasil (1a e 3a) e uma His-tag no C-terminal para facilitar a purificação
 da proteína recombinante expressa em bactéria. Estes epítopos (core, NS3, NS4A,
 NS4B e NS5) são considerados entre os mais importantes para o diagnóstico da doença
 e utilizados em muitos testes para detecção do HCV. O gene MEHCV (~720pb) possui
 sítios de restrição (NdeI e XhoI) nas suas extremidades que permitem a clonagem em
 fase no vetor de expressão bacteriano pET-21a. Para a síntese deste gene, foi feita a
 otimização para o códon usage de E. coli. A proteína de interesse (~29kDa) foi
 detectada por SDS-PAGE e Western blot. A purificação da proteína expressa foi
 realizada por cromatografia de afinidade em resina Ni-NTA. Como a purificação não foi
 total, foi feita uma nova purificação desta proteína por cromatografia de afinidade em
 coluna com resina Ni-NTA. No entanto, não houve esta purificação devido à presença
 de proteínas celulares. Sendo assim, na tentativa de alcançar a purificação total desta
 proteína multiepítopo, seria interessante a utilização de um novo protocolo, com a
 extração dos corpos de inclusão, onde todas as proteínas celulares solúveis seriam
 retiradas da solução.",
 	publisher = {Pontifícia Universidade Católica de Goiás},
 	scholl = {Ciências Ambientais e Saúde},
 	note = {Ciências da Saúde}
}